Purification de Protéines
ERRMECe met en oeuvre et développe des protocoles de purification en chromatographie basse pression pour la préparation des différentes protéines étudiées dans le laboratoire. Les différentes stratègies mises en oeuvre nous permettent de répondre à un cahier des charges exigeant : haute pureté, rendement et caractérisation biophysique systématique.
Le laboratoire est équipé de deux chaines de purification basse pression FPLC Akta Purifier 10 et AKTA Pure (GE Healthcare). Nous utilisons différentes techniques de purification :
- Affinité (Gélatine, Heparine, Concanavalin A, Blue Sepharose)
- Protéines tagguées (His tag)
- Echangeuses d’ions (anioniques/cationiques faibles ou fortes)
- Gel filtration (Sephadex, Sephacryl)
Toute protéine purifiée au laboratoire est ensuite caractérisée par différentes approches nous garantissant des résultats fiables sur sa pureté, intégrité, structure… :
- SDS-PAGE, Western Blot
- Spectroscopie UV-Vis/Fluorescence
- Diffusion de lumière
- FTIR